分子克隆一般需要在引物上加上限制性堿基序列(6-8個堿基 2-6個保護性堿基)，在引物的5’端加上這些堿基還是會影響PCR擴增，有時會擴增不出來，所以先用沒有限制性序列的引物進行一輪擴增,在分子的水平上提供了用于純化和擴增特定DNA片段的方法,Gene克隆是一個比較直觀簡單的操作程序,意義與應用-1克隆技術是在20世紀70年代發展起來的，它的出現和應用開辟了分子基因研究的新領域，打開了人類認識、識別、分離和改造基因，創造新物種的大門。
方法:DNA片段的制備，載體的選擇，片段與載體的連接。在分子的水平上提供了用于純化和擴增特定DNA片段的方法。Gene 克隆是一個比較直觀簡單的操作程序。它具有重要的生物學意義，因為這項技術可以為我們提供一個純凈的基因標本。通常，一個基因總是與細胞中的其他基因在一起。在gene 克隆 technology誕生之前，我們根本無法純化單個基因，也就是說我們只能研究和開發基因群的結構和功能，而不是特定的基因。意義與應用-1克隆技術是在20世紀70年代發展起來的，它的出現和應用開辟了分子基因研究的新領域，打開了人類認識、識別、分離和改造基因，創造新物種的大門。其成果對工業、農業、畜牧業和醫學產生深遠影響，將為解決全球面臨的能源、糧食和環保三大危機開辟新的途徑。
分子克隆一般需要在引物上加上限制性堿基序列(6-8個堿基 2-6個保護性堿基)，在引物的5’端加上這些堿基還是會影響PCR擴增，有時會擴增不出來，所以先用沒有限制性序列的引物進行一輪擴增。
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