在實驗設計前明確抗原，保證抗體的特異性和敏感性；2.確保IgG文庫中沒有雜散前體抗體；3.確保抗體制備步驟干凈嚴謹；4.確保培養基能提供足夠的營養以獲得正常表達的蛋白質；5.合理確定抗原和蛋白質濃度、抗原活性和其他細節；6.保證抗原蛋白的表達水平和穩定性；7.調整培養基pH和抗原濃度，保證抗體的最佳表達。
1。從經過特異性免疫的實驗動物中提取B細胞。2.通過動物細胞融合將B細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞。3.用特異性選擇性培養基篩選能無限增殖并產生特異性的雜交瘤細胞。4.進行體內或體外培養。體內培養是指將雜交瘤細胞注入實驗動物腹腔，日后從腹水中提取。
Yao制備Monoclonal抗體首先需要獲得具有合成特異性的單克隆B淋巴細胞抗體但這樣的B淋巴細胞不能在體外生長。但發現骨髓瘤細胞可以在體外生長繁殖，通過細胞雜交技術將骨髓瘤細胞與免疫淋巴細胞結合可以獲得雜交骨髓瘤細胞。這個雜交細胞繼承了兩個親代細胞的特征。它既具有B淋巴細胞合成的特異性抗體又具有骨髓瘤細胞的體外持久性。使用這種來源于單一融合細胞的細胞群來培養和增殖can 制備抗一種抗原決定簇的特異性單克隆。
為了制備多克隆抗體，一般采用基于免疫球蛋白基因文庫的技術。注意事項包括:1。在實驗設計前明確抗原，保證抗體的特異性和敏感性；2.確保IgG文庫中沒有雜散前體抗體；3.確保抗體 制備步驟干凈嚴謹；4.確保培養基能提供足夠的營養以獲得正常表達的蛋白質；5.合理確定抗原和蛋白質濃度、抗原活性和其他細節；6.保證抗原蛋白的表達水平和穩定性；7.調整培養基pH和抗原濃度，保證抗體的最佳表達。實驗原理是通過抗原識別抗體，從而增加免疫反應的凝聚力，達到識別敏感微小物質的目的。
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